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想问下淀粉模拟体外消化的问题已有2人参与
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就是通过这个实验来测血糖生成指数，GOPOD法和DNS法都尝试过，最后的结果始终不对； 我采用的是GOPOD法来测淀粉水解率，测试样品是红薯粉丝，虽然吸光度值随着时间推移在上升，但是计算结果仍然很低，关于这点，我真的百思不得其解。 粉丝样品，测出来的淀粉是74.5g/100g,因为实验只用了0.1ml样品液，按照浓度100mg/50ml来计算，每0.1ml样品液含淀粉149微克，但是按照GOPOD法算出来的葡萄糖含量只有1~19微克左右，换算成水解率最多只有13%，用碘检测上清液，又不呈蓝色，还请各位大佬看看，究竟问题出在哪里？？  万分感谢！！ 方法如下： A. 试剂配制： 混合酶液：称量1.16g的猪胰α-淀粉酶和0.03g的糖化酶于烧杯中加水溶解，转移至200ml容量瓶中用蒸馏水定容； 乙酸-乙酸钠缓冲液：称取1.64g乙酸钠溶于水中，加入100ml容量瓶用蒸馏水定容，并调pH至5.2。 无水乙醇，葡萄糖氧化酶试剂盒； B. 步骤： 1、称取100mg样品置于50mL离心管中（再做两个平行） 2、加入2mL水，沸水浴 10min糊化 3、添加13mL pH5.2的0.2mol/L的乙酸-乙酸钠缓冲液，在37°C恒温水浴下平衡10min； 4、再加0.2mL混合酶液（猪胰α-淀粉酶 290U/mL，糖化酶15U/mL），在37°C恒温水浴下振荡（转速为150r/min）并准确计时。 5、振荡反应0min，30min，60min，90min，120min，180min后分别取 0.1mL 上清液加入至2mL无水乙醇进行灭酶处理， 6、用GOPOD葡萄糖试剂盒在510nm处比色测定葡萄糖含量，每个样品平行测定3次取平均值，绘制淀粉水解曲线。 7、将3ml GOPOD的试剂加入0.1ml的样品溶液混合，并在40-50℃孵化20Min。在510nm波长下读取数值（和试剂空白作对比） 来源：南昌大学硕士研究生学位论文 《不同添加物对挤压重组米血糖生成指数及性质的影响》 |
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12楼2023-11-21 00:07:31
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