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花草花草

铁虫 (小有名气)

[求助] 金纳米颗粒跑电泳已有2人参与

我合成的DNA/GNP加盐不团聚,仍呈粉红色,应该是连上了。底下第一张图是其与裸金加盐后的对比,裸金团聚呈蓝色了。
       然后我想和文献中一样,用琼脂糖电泳表征,连上了DNA的金纳米颗粒能够跑出孔,呈粉红色清晰条带。但我按照文献中的条件,甚至是将胶的浓度减小到百分之零点几(接近稀巴烂了),用0.5X TBE,跑一个多小时,合成的DNA/GNP还是跑不出孔。。。郁闷,请问大家知道怎么解决吗?

金纳米颗粒跑电泳
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金纳米颗粒跑电泳-1
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花草花草

铁虫 (小有名气)

跑胶,第一孔是裸金,第二和第三孔都是合成的DNA/GNP
2楼2019-01-04 15:50:41
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by supernatural at 2019-01-07 10:06:42
把金纳米颗粒浓缩以后再跑,你的浓度太低了

我看文献用的也是5nM,所以我也用的5nM,请问一下浓度为什么会和是否跑出孔有关系呢?
4楼2019-01-07 17:21:14
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花草花草

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ashui001 at 2019-01-07 21:50:28
第二第三孔的胶体金跑出来一点,说明你的金是带负电的,你可以增加电压试试

好的,谢谢,我下次试试再把电压调高点。我现在用的150V,还觉得很高了呢
6楼2019-01-08 09:53:20
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花草花草

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by supernatural at 2019-01-08 15:02:31
5nM的金浓度很高的,你的这个颜色这么浅,明显没有5nM...

啊。。每次离心完的确吸上清总是会不知觉的吸掉一些吧,很苦恼。那我下次再浓缩几倍试试
8楼2019-01-08 16:52:47
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by supernatural at 2019-01-08 15:02:31
5nM的金浓度很高的,你的这个颜色这么浅,明显没有5nM...

不过,那个EP管里我是加了盐溶液才那么淡的,跑胶的孔里是加了体积比36%的甘油,好让金能下沉在孔里。
9楼2019-01-08 16:54:56
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花草花草

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by supernatural at 2019-01-08 16:58:46
跑胶只要几微升就够了,你把一两毫升的金离心以后去除上清,再用枪把残留的液体打散一下不就浓缩了嘛...

好的!感谢,我明天就试一下再来向您请教。
12楼2019-01-08 18:15:10
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by supernatural at 2019-01-08 16:58:46
跑胶只要几微升就够了,你把一两毫升的金离心以后去除上清,再用枪把残留的液体打散一下不就浓缩了嘛...

请问您一下,跑胶只加甘油让金下沉可以吗
14楼2019-01-14 09:59:10
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 萧晓1993 at 2019-01-12 11:20:34
我用的13孔梳,最大添加量应该是50微升左右,我加20微升,使用70V冰水浴下跑了3-4h,然而也是跟楼主一样的情况,比较费解,我在想是不是金聚合沉后就很难通过孔...

金如果聚合了不应该还是粉红色啊,应该没有聚合。请问一下你为什么用冰水浴跑呢?
15楼2019-01-16 12:05:13
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by supernatural at 2019-01-07 10:06:42
把金纳米颗粒浓缩以后再跑,你的浓度太低了

你好,请问30nm的胶体金离心为什么会聚集,超声不开了?
16楼2019-03-21 09:50:32
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